ENGnomics Co., Ltd. PCR Polymerase Product Selection Guideline
What is the UDG and how does it play a role in PCR?
Since PCR is a very sensitive detection method, a false positive amplification result can be obtained by carryover contamination of the PCR amplified product. UDG has the effect of eliminating this false positive amplification. In PCR, when dTTP and dUTP are mixed and used, U-product containing uracil is generated. uracil DNA glycosylase (UDG) removes carryover-contaminated DNA by removing uracil from this PCR amplification product (U-product). When the contaminated amplification product is removed, it is used as a DNA template derived from a true sample that does not contain uracil. With this principle, carryover contamination can be prevented during repeated PCR.
What is the end of the PCR product amplified with nTaq-Tenuto?
nTaq-Tenuto has proofreading activity. It is designed to produce 3'-A overhang PCR product with higher accuracy than normal Taq polymerase.
How to use GC melt I and GC melt II?
GC melt is a reagent that helps improve results when amplifying templates with a high GC ratio.
Since the composition and application results of GC melt I and GC melt II are different, when using the reagent for the first time, use each reagent at the concentration of 1/5, 1/10, and 1/20 of the reaction solution. Based on this, select and use the appropriate reagent and concentration.
NGnomics Co.，Ltd. PCR聚合酶产品选择指南
UDG是什么？它在PCR中如何发挥作用？
由于PCR是一种非常灵敏的检测方法，因此通过PCR扩增产物的残留污染可以获得假阳性扩增结果。 UDG具有消除这种假阳性扩增的作用。在PCR中，当将dTTP和dUTP混合使用时，会产生含有尿嘧啶的U产物。尿嘧啶DNA糖基化酶（UDG）通过从该PCR扩增产物（U产物）中去除尿嘧啶来去除残留污染的DNA。去除受污染的扩增产物后，可将其用作源自不含尿嘧啶的真实样品的DNA模板，利用此原理，可以防止重复PCR产生残留污染。
用nTaq-Tenuto扩增的PCR产物的末端是什么？
nTaq-Tenuto具有校对活动。它被设计来生产比正常Taq聚合酶更高准确性的3'-A突出PCR产物。
如何使用GC熔体I和GC熔体II？
GC熔体是一种试剂，可在以高GC比率扩增模板时帮助改善结果。
由于GC熔体I和GC熔体II的组成和使用结果不同，因此，首次使用该试剂时，每种试剂的浓度应为反应溶液的1 / 5、1 / 10和1/20。基于此，选择并使用适当的试剂和浓度。
㈜エンジノミックスPCR Polymerase製品選択のガイドライン
UDGは何であり、PCRでどのような役割をしますか？
PCRは、非常に高感度の検出方法なので、先に行われたPCR増幅産物のcarryover contaminationにより偽陽性（false positive）増幅の結果を示すことができます。 UDGは、このような偽陽性増幅を除去する効果があります。 PCR時dTTPとdUTPを混合して使用すると、uracilを含むU-productが生成されます。 uracil DNA glycosylase（UDG）は、このようなPCR増幅産物（U-product）のuracilを除去してcarryover contaminationされたDNAを除去します。汚染された増幅産物が除去されると、uracilを含まない真の検体由来のDNA templateとして使用され、このような原理で反復的なPCR時carryover汚染を防止することができるようになります。
nTaq-Tenutoで増幅されたPCR産物の末端は、どのような形ですか？
nTaq-Tenutoはproofreading活性を保持しています。一般Taq polymeraseよりも高い精度を持ちながらも3'-A overhang PCR productを生成するように設計されました。
GC melt IとGC melt IIの使用方法は何ですか？
GC meltはGCの割合が高いtemplateを増幅するときに、結果の改善に役立つ試薬です。
GC melt IとGC melt IIの組成および適用の結果が異なりますので、初めての試薬を使用する際に、それぞれの試薬を反応液の1/5、1/10、1/20の濃度で使用して、事前の実験を行った後、これを基に適正試薬との濃度を選択して使用してください。
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